流式細胞儀儀器的操作和使用
更新時間:2016-10-28瀏覽:3493次
流式細胞儀是對細胞進行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學方面的特征參量,并可以根據(jù)預選的參量范圍把的細胞亞群從中分選出來。多數(shù)流式細胞計是一種零分辨率的儀器,它只能測量一個細胞的諸如總核酸量,總蛋白量等指標,而不能鑒別和測出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是說,它的細節(jié) 分辨率為零。
流式細胞儀儀器的操作和使用
?、俅蜷_電源,對系統(tǒng)進行預熱;
②打開氣體閾,調節(jié) 壓力,獲得適宜的液流速度;開啟光源冷卻系統(tǒng);
?、墼跇悠饭苤屑尤肴ルx子水,沖洗液流的噴嘴系統(tǒng);
?、芾眯蕵藴蕵悠?,調整儀器,使在激光功率、光電倍增管電壓、放大器電路增益調定的基礎上,0和90散射的熒光強度強,并要求變異系數(shù)為??;
?、葸x定流速、測量細胞數(shù)、測量參數(shù)等,在同樣的工作條件下測量樣品和對照樣品;同時選擇計算機屏上數(shù)據(jù)的顯示方式,從而能直觀掌握測量進程;
?、迾悠窚y量完畢后,再用去離子水沖洗液流系統(tǒng);
?、咭驗閷嶒灁?shù)據(jù)已存入計算機硬盤(有的機器還備有光盤系統(tǒng),存貯量更大),因此可關閉氣體、測量裝置,而單獨使用計算機進行數(shù)據(jù)處理;
?、鄬⑺杞Y果打印出來。
流式細胞儀操作和使用中的注意事項
1)光電倍增管要求穩(wěn)定的工作條件,暴露的較強的光線下以后,需要較長時間的“暗適應”以消除或降低部分暗電流本底才能工作;另外還要注意磁屏蔽;
2)光源不得在短時間內(一般要1h左右)關上又打開;使用光源必須預熱并注意冷卻系統(tǒng)工作是否正常;
3)液流系統(tǒng)必需隨時保持液流暢通,避免氣泡栓塞,所使用的鞘流液使用前要經過過濾、消毒;
4)注意根據(jù)測量對象的變換選用合適的濾片系統(tǒng)、放大器的類型等;
5)特別強度每次測量都需要對照組。