定量PCR儀的循環(huán)參數修改方法刪除:按住Shift鍵并在相應的Stage或Step中點擊,使該步驟被選中變黑,再按Del鍵即可刪除。
插入:在需要插入參數的位置點擊,出現粗黑豎線后,分別點擊Add Hold、Add Cycle或Add Step按鈕添加保溫、循環(huán)或循環(huán)中的一個步驟。
修改溫度和時間:拖動鼠標,選中需要修改的溫度或時間數字,輸入新的數值即可。
其他設置反應體積:定量PCR儀的標準反應體積是50µL;如果想修改的話,建議大于25µL。
融解曲線試驗:在Dissociation Protocol選項左邊的方框中打鉤,儀器即在定量PCR儀循環(huán)完成后繼續(xù)做融解曲線試驗。
啟動擴增點Save按鈕保存文件設置。確認96孔板或全部樣品管在主機內放置妥當后,點擊Start按鈕,開始PCR循環(huán)。屏幕上動態(tài)顯示PCR進程和剩余時間。
監(jiān)控進程切換到Results頁面的Amp Plot子頁面,可以實時顯示PCR曲線隨著循環(huán)增加而逐步增長的實際情況。如果Detector選FAM或VIC,只顯示對應探針的變化情況;如果選All,則同時顯示所有探針的反應進程。
保存結果程序結束后,點Disconnect按鈕,然后File→Save保存實驗結果??梢员4鏋?sds格式,也可以保存為.sdt格式,作為以后同類實驗的模板,節(jié)省軟件設置時間。