要想很好地應用
BD流式細胞儀分析和分選技術,必需先對BD流式細胞儀進行調試,使其處于良好的工作狀態(tài),并能正確使用儀器。下面就來簡單介紹下BD流式細胞儀的調試:
BD流式細胞儀在使用前,甚至在使用過程中都要精心進行調試,以保證工作的可靠性和佳性。調試的項目主要是激光強度、液流速度和測量區(qū)的光路等。
1.激光強度:除調整反射鏡的角度以調整到所需波長的激光出光外,還要結合顯示屏上的光譜曲線使激光的強度輸出為大。
2.液流速度:可通過操作臺數(shù)字顯示監(jiān)督,調節(jié)氣體壓力大小以獲得穩(wěn)定的液流速度。
3.測量區(qū)光路調節(jié):這是調試工作的關鍵。需要保證在測量區(qū)的液流、激光束、90散射測量光電系統(tǒng)垂直正交,而且交點較小。一般可在用標準熒光微球等校準中完成。
流式細胞術中所測得的量是相對值,因此需要在使用前或使用中對
BD流式細胞儀系統(tǒng)進行校準或標定,這樣才能通過相對測量獲得的意義。
儀器的準直調整和定量標度。標準樣品應該穩(wěn)定,有形成份形狀應是大小比較一致球形,樣品分散性能良好,且經濟、容易獲得。常用標準熒光微球作為非生物學標準樣品,雞血紅細胞做為生物學標準樣品。微球用樹脂材料制作,或標有熒光素,或不標記熒光素。