流式細胞術(shù)(Flow Cytometry,F(xiàn)CM)是在流式細胞儀的基礎(chǔ)上,對處于快速直線流動狀態(tài)的單列細胞或生物顆粒進行逐個、多參數(shù)、快速定性、定量分析的一種高新技術(shù),具有高通量、多參數(shù)、速度快,采集數(shù)據(jù)量大、操作靈活等優(yōu)點。最開始檢測單細胞內(nèi)DNA、RNA含量,蛋白質(zhì)或線粒體等大分子結(jié)構(gòu)和細胞動力學(xué),到如今拓展到細胞表面標志及抗原決定簇的研究、細胞抗原表達、免疫功能測定、細胞分選和鑒定、基因表達蛋白檢測、細胞內(nèi)細胞因子鑒定等多個研究領(lǐng)域,在市場上應(yīng)用極為廣泛。
流式細胞儀(flow cytometer,F(xiàn)CM)是以流式細胞術(shù)為核心技術(shù),集光學(xué)、電子學(xué)、流體力學(xué)、細胞化學(xué)、生物學(xué)、免疫學(xué)以及激光和計算機等多門學(xué)科和技術(shù)于一體的先進科學(xué)技術(shù)設(shè)備。是現(xiàn)代科學(xué)研究中的先進儀器之一,被譽為實驗室的”CT”。流式細胞儀主要由液流系統(tǒng)、光路系統(tǒng)、檢測分析系統(tǒng)三部分組成。部分儀器在電子系統(tǒng)中具有分選功能,通過對粒子進行充電和偏轉(zhuǎn),達到對細胞的分選并分析的目的。
流式細胞術(shù)原理
利用流式細胞術(shù)快速精確的對單個細胞的理化性質(zhì)進行定量分析和分選,主要通過幾個步驟:制備單細胞懸液,用特異性熒光染料標記的抗體進行染色,經(jīng)染色后的待測細胞在一定氣體壓力下被壓入流動室,在鞘液的包裹下細胞呈單行排列,依次通過檢測區(qū)域,在激光束的照射下細胞會產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光。這兩種信號會同時被光電倍增管( PMT) 接收。接收后可轉(zhuǎn)換為電信號,通過模/數(shù)轉(zhuǎn)換器,將連續(xù)的電信號轉(zhuǎn)換為可被計算機識別的數(shù)字信號,進行分析。