1.使用
定量PCR儀做熒光標(biāo)記方法,如何設(shè)定淬滅基團(tuán)?
在7300/7500定量PCR儀操作軟件上,定量PCR儀做報(bào)告基團(tuán),淬滅基團(tuán)選擇“None”。
2.定量PCR儀樣品的升降溫速率是多少?
標(biāo)準(zhǔn)模式:1.6℃/s升溫,1.6℃/s降溫;
仿真模式:0.8℃/s升溫,1.6℃/s降溫;
快速模式:3.5℃/s升溫,3.5℃/s降溫。
3.定量PCR儀是否可以做多重定量?
可以,軟件提供多組分算法,用于校正光譜交叉,從而保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。
4.定量PCR儀快速反應(yīng)體系是多大?
定量PCR儀快速模塊支持反應(yīng)體系為10µl-30µl。
5.定量PCR儀上加入每個(gè)反應(yīng)樣本的量是多少?
反應(yīng)體系中推薦的模版量的范圍是10-100ng gDNA/cDNA每孔。
6.定量PCR儀上普通模式和快速模式的數(shù)據(jù)收集是否相同?
數(shù)據(jù)收集是*相同的,在整個(gè)數(shù)據(jù)收集過程中,收集五個(gè)濾光片的信號(hào),以原始數(shù)據(jù)的方式進(jìn)行顯示。
7.定量PCR儀可以使用0.2ml PCR反應(yīng)管或者96孔板嗎?
不可以,定量PCR儀只支持0.1ml PCR反應(yīng)管或者96孔板。
8.如何監(jiān)控反應(yīng)體系是否有蒸發(fā)?
查看信號(hào)是否在整個(gè)定量PCR儀過程中保持一致。在多組分圖譜界面,選擇單孔,如果Rox信號(hào)逐漸增高,代表樣品孔中有蒸發(fā)。