RCCS-3D三維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)(Three-Dimensional Cell Culture System, TDCC)是指利用具有三維結(jié)構(gòu)的載體材料,在體外構(gòu)建一個模擬生物體內(nèi)自然生長環(huán)境的三維立體空間,使細(xì)胞能夠在其中遷移、生長、分化和相互作用,形成類似于體內(nèi)組織的結(jié)構(gòu)和功能。這一技術(shù)通過提供多方向的生長空間和復(fù)雜的細(xì)胞間相互作用環(huán)境,提高了細(xì)胞培養(yǎng)的生物相似性和實(shí)用性。
核心組成部分:
三維培養(yǎng)基:通常為水凝膠或纖維矩陣,為細(xì)胞提供支撐和營養(yǎng),同時允許細(xì)胞在其中自由生長和擴(kuò)散。
支架材料:三維結(jié)構(gòu)的多孔材料,如天然生物材料(膠原蛋白、透明質(zhì)酸等)和合成聚合物,為細(xì)胞提供附著和生長的空間。
生物相似性高:能夠更好地模擬生物體內(nèi)的自然生長環(huán)境,使細(xì)胞在三維空間中形成類似于體內(nèi)組織的結(jié)構(gòu)和功能。
細(xì)胞功能增強(qiáng):在三維環(huán)境中,細(xì)胞間相互作用增強(qiáng),形成更復(fù)雜的細(xì)胞間信號傳導(dǎo)網(wǎng)絡(luò),從而提高細(xì)胞的功能。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果更具預(yù)測性:由于更接近生物體內(nèi)環(huán)境,在藥物篩選、毒性測試等方面具有更高的預(yù)測性。
操作復(fù)雜性增加:需要特殊的設(shè)備和技術(shù)支持,對實(shí)驗(yàn)人員的技術(shù)水平要求較高。
成本較高:設(shè)備和耗材成本相對較高,且實(shí)驗(yàn)過程需要更多的技術(shù)和時間投入。
RCCS-3D三維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)的操作步驟:
準(zhǔn)備階段:將三維培養(yǎng)基融化并預(yù)冷,同時準(zhǔn)備無菌的細(xì)胞培養(yǎng)板和移液器槍頭等工具。
包被培養(yǎng)板:使用瓊脂糖等材料包被培養(yǎng)板,為細(xì)胞生長提供基礎(chǔ)支撐。
細(xì)胞懸液制備:將對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行消化、計(jì)數(shù),并與三維培養(yǎng)基混合,制備成細(xì)胞懸液。
接種細(xì)胞:將細(xì)胞懸液接種到包被好的培養(yǎng)板中,并進(jìn)行離心等操作,使細(xì)胞在三維培養(yǎng)基中均勻分布。