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1、使用SYBR®GreenⅠ做熒光標(biāo)記方法，如何設(shè)定淬滅基團(tuán)？在ABI7500定量PCR儀操作軟件上，SYBR®GreenI做報(bào)告基團(tuán)，淬滅基團(tuán)選擇“None”。2、ABI7500定量PCR儀樣品的升降溫速率是多少？標(biāo)準(zhǔn)模...
熒光定量PCR儀的PCR技術(shù)擴(kuò)增時(shí)引物與己提供DNA雙鏈有何關(guān)系？單鏈DNA在互補(bǔ)寡聚核苷酸片段的引導(dǎo)下，可以利用DNA聚合酶按5’→3’方向復(fù)制出互補(bǔ)DNA。這時(shí)單鏈DNA稱為模板DNA，寡聚核苷酸片段稱為引物，合成的互補(bǔ)DNA稱為產(chǎn)物D...
熒光定量PCR儀引物設(shè)計(jì)的目的是為了找到一對(duì)合適的核苷酸片段，使其能有效地?cái)U(kuò)增模板DNA序列。因此，引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否。要設(shè)計(jì)引物首先要找到DNA序列的保守區(qū)。同時(shí)應(yīng)預(yù)測(cè)將要擴(kuò)增的片段單鏈?zhǔn)欠裥纬啥?jí)結(jié)構(gòu)。如這個(gè)區(qū)...
熒光定量PCR技術(shù)已成為臨床分子檢測(cè)的重要手段之一，其以敏感性、特異性而被越來(lái)越多的科研職員所看好，熒光定量PCR儀的性能與檢測(cè)結(jié)果的正確性密切相關(guān)。下面我們來(lái)看看熒光定量PCR儀的操縱程序：1、編輯樣本1）單擊“EditSample”，進(jìn)...
1.熒光定量PCR儀擴(kuò)增產(chǎn)物在電泳分析時(shí)沒(méi)有條帶或條帶很淺·常見(jiàn)的原因在于反應(yīng)體系是PCR的反應(yīng)體系而不是RT-PCR的反應(yīng)體系；·與反應(yīng)起始時(shí)RNA的總量及純度有關(guān)；·建議在試驗(yàn)中加入對(duì)照RNA；·*鏈的反應(yīng)產(chǎn)物在進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí)，在總的...
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