解析Eppendorf5424R離心機的多種類型
Eppendorf5424R離心機的分離技術(shù)是根據(jù)顆粒在一個實用離心場合中的狀態(tài)而發(fā)展起來的新技術(shù)。不同密度、大小或形狀的顆粒在不同速度的離心場合中沉降,所以一個大體是球形非均一的混合物,可以用離心的方法加以分離,是為了進一步研究生物化學(xué)、分離大量的物質(zhì)。例如收集細胞、分離血漿,從這些預(yù)純化的制劑中分離DNA和蛋白質(zhì)分子,并可分離出病毒以及大規(guī)模大腸桿菌、嚴細胞成份、核蛋白微粒等。
離心機都可以配置不同大小的離心管,只要改變轉(zhuǎn)子或者使用不同的/適配器相配的轉(zhuǎn)子。轉(zhuǎn)子是離心機用于分離試樣的核心部件,轉(zhuǎn)子規(guī)格、品種的多少是衡量離心機生產(chǎn)技術(shù)掌握程度的重要標志,轉(zhuǎn)子一般可分為下列五大類:
1.固定角轉(zhuǎn)子:
主要用于分離沉降速度有明顯差異的顆粒樣品。顆粒在扇形溶地移動的距離很短,碰到外壁的顆粒沿著管壁滑到管底,形成沉淀,因此這種轉(zhuǎn)子能很快地收集沉淀物。分離過程中,由于管壁的作用,在離心管內(nèi)將會引起強烈的對流,對具有相同沉降速率的顆粒會產(chǎn)生不良影響。
2.甩平轉(zhuǎn)子:
主要用于樣品作密度梯度離心。顆粒移動距離長,溶液中的組分相對于管壁的位置在離心過程中和離心后不發(fā)生改變,因此離心效果好,但因顆粒在離心場中是從旋轉(zhuǎn)中沿徑向散離出去,而不是按相互平行的路線沉降。顆粒碰到外壁沿著管壁滑到管底,因此也會產(chǎn)生對流。
3.連續(xù)離心轉(zhuǎn)子:
主要用于懸浮介質(zhì)中高速分離較小的顆粒物質(zhì),利用離心淘析技術(shù)對整細胞或大的亞細胞粒子進行分離,在無菌和低溫條件下,被分離的組分,能保持活性,回收率高等優(yōu)點。如果液流方向與離心力方向相反,即降低了粒子運行速度,相當于增長了運行距離,從而提高了分辨能力。
4.區(qū)帶轉(zhuǎn)子:
主要用于大容量的密度梯度離心,當實驗所需制備的樣品量多,而甩平轉(zhuǎn)子因受到量的限制時,采用區(qū)帶離心是較好的。區(qū)帶轉(zhuǎn)子避免了用離心管所引起的壁效應(yīng)和干擾,提高了分辨率。
5.垂直轉(zhuǎn)子:
主要用于樣品在短時間作密度梯度離心。甩平轉(zhuǎn)子分離粒子位移距離長,分辨能力高,分離后組分的區(qū)帶較寬,便于回收,但所需時間長,垂直轉(zhuǎn)子分離的粒子位移距離等于離心管直徑。轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)動前,管內(nèi)密度梯度溶液的密度是沿重力方向變化,轉(zhuǎn)動后,溶液的密度逐漸改變?yōu)殡x心力方向(水平方向)變化,離心結(jié)束后,溶液的密度變化方向因重力作用又沿鉛垂方向變化,形成鉛垂方向的密度梯度,由于離心管是垂直放置,所以溶液粒子位移的距離等于離心管的直徑。離心時間短,離心后樣品組分的區(qū)帶較寬,但因離心時間短,粒子得不到充分分離,將會失去一些組分,又因區(qū)帶與梯度介質(zhì)的接觸面大,易于擴散,停機后密度重新定向,易于混合,所以作區(qū)帶離心的效果,垂直轉(zhuǎn)子不于甩平轉(zhuǎn)子。