定量PCR儀使用基于化學(xué)熒光的PCR檢測(cè)手段,提供采用實(shí)時(shí)分析法的核酸序列定量檢測(cè),和采用終點(diǎn)和熔解曲線分析法的核酸序列定性檢測(cè)功能。定量分析定量PCR儀允許使用96孔板格式的反應(yīng)板或試管執(zhí)行幾種檢測(cè)分析。
關(guān)于定量PCR儀定量分析:
1.定義:定量分析用于確定未知樣本中某個(gè)目標(biāo)核酸序列的量值。
2.定量PCR儀實(shí)時(shí)PCR分析:定量(AQ)分析以實(shí)時(shí)PCR方式執(zhí)行。在實(shí)時(shí)PCR分析過程中,PCR基因擴(kuò)增一直在您的監(jiān)控之中。在PCR進(jìn)行期間進(jìn)行數(shù)據(jù)采集,而不是在PCR結(jié)束時(shí)(終點(diǎn)PCR)才獲取數(shù)據(jù)。
在定量PCR儀實(shí)時(shí)PCR中,反應(yīng)是在目標(biāo)的擴(kuò)增早被監(jiān)測(cè)到時(shí)用循環(huán)中的時(shí)間點(diǎn)來描述的,而不是在PCR結(jié)束時(shí)通過目標(biāo)的累積數(shù)來描述。
3.使用定量反應(yīng)板文件進(jìn)行陽性/陰性分析和等位基因鑒別分析
盡管陽性/陰性分析和等位基因鑒別(AD)分析是終點(diǎn)分析,建議使用定量PCR儀執(zhí)行擴(kuò)增,并觀察實(shí)時(shí)PCR結(jié)果。若一旦實(shí)驗(yàn)失敗,可通過研究擴(kuò)增圖譜來幫助確定實(shí)驗(yàn)失敗的原因。使用定量反應(yīng)板文件來存儲(chǔ)陽性/陰性分析和等位基因鑒別(AD)分析的實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)。用于陽性/陰性分析和等位基因鑒別分析的定量反應(yīng)板文件,不需要標(biāo)準(zhǔn)曲線。